Biotechnologies

utilisation d’organismes vivants pour engendrer de nouvelles méthodes de production et créer de nouveaux produits

méthode de manipulation des gènes à des fins pratiques

molécule circulaire d’ADN qui se réplique séparément possède peu de gènes

-découpage du squelette désoxyribose-phosphate par les enzymes de restriction -ajout de fragment d’ADN provenant d’une autre source et les extrémités cohésives s’associent par appariement des bases -ligature des brins par l’adn ligase

-insertion du gène dans plasmide (vecteur de clonage) -plasmide inséré dans une bactérie -cellule hôte mise en culture pour former un clône

-peut l’obtenir des fournisseurs commerciaux -peut manipuler pour former des plasmides recombinés par insertion de l’ADN étranger

gène de résistance aux antibiotiques(cellule bactérienne): seules ceux qui le possède vont survivre

sert à introduire un ADN étranger dans une cellule hôte en facilitant sa réplication

vecteur de clonage comportant un promoteur bactérien en amont du site de restriction à l’endroit où le gène eucaryote peut être inséré

-Pas de maturation de l’ARNm(épissage qui enlève les introns) -pas de modification post-traduction pour contourner il faut modifier cellules eucaryotes

• Dénaturation : chauffage pour séparer brins d’ADN • Hybridation : refroidissement pour lier amorces aux extrémités • Élongation : ajout de nucléotides par ADN polymérase

sépare les acides nucléiques et protéines en fonction de leur tailles et de leur charges électrique -molécules de charge négatives se dirigents vers électrode positive -mettre colorant et exposer à lumière UV

potentiel à générer des cellules souches

cellules peu différenciées qui continue à se diviser en cellules spécialisées

cellules capables de se différencier en tout types de cellules sauf extra-embryonnaire

différencie en toutes cellules de l’organismes

guérir maladies génétiques en insérant allèles normal dans cellules somatiques atteintes 1.insertion ARN normal dans rétrovirus 2.virus infecte cellules patient prélevé et mis en culture 3. insertion ADN viral portant allèle normal inséré dans chromosomes 4.injection cellules modifiées patient

alternative plus sécuritaire et plus précise, méthode défense des bactéries -lie protéine Cas9 à ARN guide transformé pour dirigier cas9 vers gène cible (avec bonne séquence complémentaire) 2. séquence complémentaire ARN guide se lie au gène cible et sites actifs de Cas9 découpe brins ADN en 2 3. brins sont réparés par cellules par 2 moyens

chèvre porte gène protéine sang humain qu’elle sécrète dans son lait peut guérir humain

analyse des répétitions courtes en tandem (STR)